128-13-2

    (1)3α,7α-二乙酰胆酸甲酯的制备：
    取无水甲醇36ml，通入1g干燥氯化氢气体，加胆酸12g，搅拌，加热回流20-30min，室温放置数小时后析出晶体，冷冻，过滤，用乙醚洗涤，干燥，得胆酸甲酯。取胆酸甲酯2g，加苯9.6ml，加吡啶2.4ml，加乙酐2.4ml，振摇10-15min，室温放置20h，将反应液倒入100ml水中，除去苯层，反复用蒸馏水洗涤，回收溶剂，固体残渣用石油醚洗涤1次，用甲醇-水溶液重结晶，得3α,7α-二乙酰胆酸甲酯。

    胆酸→胆酸甲酯→3α,7α-二乙酰胆酸甲酯

    (2)鹅去氧胆酸的制备：
    取二乙酰胆酸甲酯1.5g，加乙酸24ml，加铬酸钾溶液(取铬酸钾0.76g溶于1.8ml水中)，加热至40℃，反应8h，加水120ml，振摇片刻，放置12h，过滤，用蒸馏水洗至中性，干燥，得3α,7α-二乙酰氧基-12-酮基胆烷酸甲酯，简称12-酮。取12-酮15g，加二乙二醇醚150ml，加80%水合肼溶液15ml，加氢氧化钾15g，加热至30℃回流15h，升温至195-200℃，回流2.5h，升温至217℃反应片刻，冷却至190℃，加水合肼溶液0.7ml，在3h内由215℃升温至220℃，冷却，加蒸馏水600ml，加10%硫酸调pH3，析出结晶，过滤，水洗至中性，加乙酸乙酯，弃去水层，有机层用水洗1-2次，减压蒸馏，得白色3α,7α-二羟基胆烷酸，即鹅去氧胆酸。

    3α,7α-二乙酰胆酸甲酯→3α,7α-二乙酰氧基-12-酮基胆烷酸甲酯→3α,7α-二羟基胆烷酸(鹅去氧胆酸)

    (3)本品精品的制备：
    取鹅去氧胆酸2g，加100ml乙酸，加乙酸钾20g，振摇溶解，加铬酸钾1.5g(溶于10ml水中)，室温放置过夜，加水200ml，析出结晶，过滤，水洗，干燥，得3α-羟基-7-酮基胆烷酸。取3α-羟基-7-酮基胆烷酸4g，加正丁醇100ml，加热至约115℃，分次加入金属钠8g，逐渐有白色浆状物析出，继续反应30min，加水120ml，搅拌升温溶解透明，减压蒸去有机层，残渣加水500ml，溶解，过滤，滤液加10%硫酸调pH3，有白色絮状物沉淀，过滤，水洗至中性，干燥，加乙酸乙酯洗涤，稀乙醇结晶，得3α,7β-二羟基胆烷酸，即本品精品。

    鹅去氧胆酸[铬酸钾]→3α-羟基-7-酮基胆酸[金属钠，115℃]→3α,7β-二羟基胆烷酸(本品)

    (二)方法二：
    以猪胆盐或猪胆汁为原料。

    利用薄层层析法从猪胆盐或猪胆汁中，分离出本品。猪胆盐中含有游离型和结合型的UDCA，其含量约30%；猪胆汁中含有结合型UDCA，含量约0.6%。

2.熊去氧胆酸(128-13-2)的质量标准：
    中国药典2000年版
    指标名称                                指标
    含量(C₂₄H₄₀O₄)/%                      ≥98.5
    熔点/℃                             200～204
    比旋度                     ＋59.0°～＋62.0°
    异臭                                      无
    氯化物/%                             ≤0.020
    硫酸盐/%                             ≤0.050
    干燥失重/%                             ≤1.0
    炽灼残渣/%                             ≤0.2
    钡盐                                      无
    重金属                        ≤百万分之二十
    砷盐/%                              ≤0.0002

3.制剂：
    片剂质量标准如下。

    中国药典2000年版
    指标名称                                    指标
    含量(C₂₄H₄₀O₄)/%           为标示量的95.0～105.0
    检查                        符合片剂项下有关规定

4.药理作用和临床作用：
　　长期服用本药可增加胆汁酸分泌，并是胆汁成分改变，降低胆汁中胆固醇及胆固醇脂，有利于胆结石中的胆固醇逐渐溶解，用于不宜手术治疗的胆固醇结石，但不能溶解胆色素结石、混合结石及不透X线的结石。对胆囊炎。胆道炎及消化不良亦有一对疗效。

5.鉴别：
    (1)取本品10mg，加硫酸1ml与甲醛1滴使溶解，放置5分钟后，再加水5ml，生成蓝绿色悬浮物。
　　(2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。

6.熊去氧胆酸(128-13-2)的检查：
    (1)异臭：
    取本品2.0g，加水100ml，煮沸2分钟，应无臭。

　　(2)氯化物：
    取本品1.0g，加冰醋酸10ml，振摇使溶解，加水稀释至100ml，摇匀，放置10分钟，滤过，取续滤液25ml，依法检查，与标准氯化钠溶液5.0ml制成的对照液比较，不得更浓(0.02%)。

　　(3)硫酸盐：
    取上述氯化物项下剩余的滤液40ml，依法检查，与标准硫酸钾溶液2.0ml制成的对照液比较，不得更浓(0.05%)。

　　(4)有关物质：
    取本品，加氯仿-乙醇(9:1)制成每1ml中含1.0mg的溶液，作为供试品溶液；另取鹅去氧胆酸对照品，加氯仿-乙醇(9:1)制成每1ml中含15μg的溶液，作为对照品溶液(1)；再取胆石酸对照品，加氯仿-乙醇(9:1)制成每1ml中含1.0μg的溶液，作为对照品溶液(2)。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以氯仿-丙酮-冰醋酸(7:2:1)为展开剂，展开后，晾干，于120℃加热30分钟，喷以20%磷钼酸的乙醇溶液，再在120℃加热2～3分钟，立即检视。供试品溶液如显与对照品溶液(1)相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液(1)的主斑点比较，不得深；如显其他杂质斑点，其颜色与对照品溶液(2)所显的主斑点比较，不得更深。
 
　　(5)干燥失重：
    取本品，在105℃干燥2小时，减失重量不得过1.0%。

　　(6)炽灼残渣：
    取本品1.0g，依法检查，遗留残渣不得过0.2%。
 
　　(7)钡盐：
    取异臭项下的溶液，加盐酸2ml，煮沸2分钟，放冷，滤过，并用水洗涤，洗液与滤液合并使成100ml，摇匀；取10ml，加稀硫酸1ml，不得发生浑浊。
 
　　(8)重金属：
    取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查，含重金属不得过百万分之二十。

　　(9)砷盐：
    取本品1.0g，加水23ml溶解后，加盐酸5ml，依法检查，应符合规定(0.0002%)。

7.含量测定：
    取本品约0.5g，精密称定，加中性乙醇(对酚酞指示液显中性)40ml与新沸过的冷水20ml，溶解后，加酚酞指示液2滴，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定，至近终点时，加新沸过的冷水100ml，继续滴定至终点。每1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于39.26mg的C₂₄H₄₀O₄。

8.用法用量：
　　胆固醇性胆结石10 mg/kg体重/日。结石必须是X射线能穿透的，同时胆囊收缩功能须正常。原发性胆汁淤积性肝硬变，原发性硬化性胆管炎15mg/kg体重/日。胆汁返流性胃炎250mg/日，睡前服。
 
9.不良反应：
　　治疗期可引起胆结石钙化，软便。

10.禁忌症：
　　急性胆系感染、胆道梗阻、孕妇及哺乳期妇女。

11.药物相互作用：
　　与消胆胺、考来替泊及含氢氧化铝的抗酸剂合用可致本药吸收减少。

　　本品(3α,7β-二羟基-5β-胆烷酸，UDCA)是一种二羟基胆酸，在人类总胆汁中占3%。最早由日本冈山大学的Shoda从中国熊胆汁中分离而命名，1985年Leuschner等用其治疗合并肝炎的胆结石时发现血清转氨酶降低，此后大量临床研究也证实了UDCA对一些肝病有确切的治疗作用。现将其治疗肝病的作用机制及疗效简介如下：

    (1)作用机制：
　　胆汁淤积性肝病与鹅去氧胆酸、去氧胆酸和石胆酸的积聚有关，这些胆酸由于去垢作用而引起肝细胞损害。UDCA是一种无毒性的亲水胆酸，能竞争性地抑制毒性内源性胆酸在回肠的吸收。通过激活钙离子、蛋白激酶C组成的信号网络，并通过激活分裂活性蛋白激酶来增强胆汁淤积肝细胞的分泌能力，使血液及肝细胞中内源性疏水胆酸浓度降低，达到抗胆汁淤积的作用。UDCA还能竞争性地取代细胞膜和细胞器上的毒性胆酸分子，防止肝细胞和胆管细胞受到更多毒性胆酸的损害。

    上述作用具体表现在：
    (1)细胞保护作用。UDCA结合物能明显减轻疏水胆酸诱发的肝细胞的细胞溶解，减少培养鼠和人类肝细胞由毒性胆酸诱发的细胞凋亡。
    (2)膜稳定作用。UDCA可防止胆酸诱发的腺粒体膜渗透性改变，也就是说可通过膜稳定作用来防止毒性胆酸诱发的腺粒体膜、基底膜和小胆管膜损害。
    (3)抗氧化作用。UDCA能抑制毒性胆酸引起的枯否细胞激活，还能增加肝细胞谷胱甘肽和含硫醇蛋白的水平，防止肝细胞的氧化损伤。
    (4)免疫调节作用。UDCA通过降低疏水胆酸的刺激作用间接抑制，并通过激活糖皮质激素受体直接抑制组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类和Ⅱ类基因的表达。

    (2)临床应用：
　　原发性胆汁性肝硬化(PBC)。PBC是主要发生于中年妇女的慢性进行性胆汁淤积性肝病，可能与免疫因素有关。Pares等进行了一项试验，平均活组织检查间隔时间为4.5年。结果发现，UDCA确能防止PBC组织学分期的进展。1999年Angulo等报道，在一项UDCA对非肝硬化PBC患者的长期治疗试验(平均6.6年)中，与接受无效治疗组患者相比，治疗组发生肝硬化的时间推迟。在大多数的UDCA治疗试验中，所用剂量为每日13～15毫克/千克。最近的两项旨在探讨UDCA合适剂量的研究发现，每日13～15毫克/千克和20～25毫克/千克的剂量疗效均优于每日10～15毫克/千克或以下。UDCA与甲氨喋呤或秋水碱联合治疗PBC的疗效并不优于单用UDCA；但与泼尼松或泼尼松加硫唑嘌呤合用，其改善炎症的疗效显著优于单用UDCA。

　　原发性硬化性胆管炎(PSC)。PSC为一种罕见的胆汁淤积性疾病，表现为肝内外胆管狭窄和扩张。最近的一项由105例患者组成，治疗时间平均为2.2年的前瞻性随机安慰剂对照试验(UDCA每日13～15毫克/千克)显示，患者的生化指标显著改善，临床症状和肝组织学均无显著变化。但对于明显的胆管狭窄，在内镜治疗的同时加用UDCA可以改善患者的预后。

　　妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)。ICP常发生于妊娠晚期，主要症状为，孕妇出现瘙痒、黄疸，可致早产、死胎、死产等并发症。目前认为是在遗传的基础上，与体内雌激素升高有关。一项UDCA治疗IPC的随机双盲安慰剂对照试验包括15例患者，治疗组瘙痒和肝生化指标有改善，8例孕妇(接受UDCA1.0克/天)在或近预产期分娩；而用安慰剂治疗的7例孕妇中有5例在孕36周分娩，其中1例为死胎。治疗期间未见母、婴副作用发生。因此，UDCA治疗ICP似乎是有效安全的。

　　胆囊纤维化肝病(CF)。Colom鄄bo等在一项包括55例患者的随访双盲安慰剂对照试验中，将UDCA治疗(每日15毫克/千克)1年后与安慰剂组进行比较。结果发现，治疗组症状、营养情况、生化指标等均显著改善。VandeMeeberg和SulliVan等报道，较高剂量UDCA(每日20毫克/千克)的疗效优于较低剂量(每日5～15毫克/千克)。

　　慢性丙型肝炎。2001年有几项UDCA联合α-干扰素治疗慢性丙型肝炎的随机安慰剂对照试验报道，治疗后生化指标改善，但对丙肝病毒(HCV)-RNA的清除无效，肝组织学特征也无改变。

　　其他。有研究显示，UDCA与环孢素A及甲氨喋呤合用治疗异型骨髓移植，UDCA能防止静脉闭塞和急性移植物抗宿主病的发生。每日15毫克/千克的UDCA可改善进行性家族性肝内胆汁淤积症、胆管闭锁以及全胃肠外营养相关肝病的胆汁淤积症状及生化指标。UDCA用于治疗其他肝病的研究也已开展，如酒精性肝病、非酒精性脂肪肝、良性复发性肝内胆汁淤积症、先天性肝内胆管囊性扩张症、自身免疫性肝炎和急性肝炎等，其疗效均有待进一步评价。

12.贮藏：
    遮光，密闭保存。